转基因动物的关键技术：包括目的基因的分离、表达载体的构建、基因受体（早期胚胎）的获得、 基因的导人、转基因胚胎的移植、被转基因的整合表达、检测及补充转基因的 遗传稳定性测试等。其中目的基因的构建和导人是转基因技术实施的关键 步骤。
转基因动物的基因导入方法 1.原核注射法世界上第一只转基因小鼠就是用这种方法获得的。该方 法是借助显微操作仪，利用精细的显微注射针将外源基因直接注人单细胞受精 卵的原核中，使外源基因整合到动物的基因组中。这是最主要的一种转基因方 法，其优点是基因用量小，导人确实可靠，准确性较高，但缺点是整合效率 低，仅为1%左右，而且不能定点整合，影响外源基因的表达与遗传稳定性。
反转录病毒感染法该方法是将目的基因整合到反转录病毒的原病毒 基因组中，然后将原病毒注入早期胚胎，或是给动物的培养细胞接毒后与胚胎 一起培养，使病毒感染胚胎，得到转基因动物。这是最早使用的动物转基因方 法。该方法能大大提高整合率，且技术难度不高，实验成本也较低，但存在着 携带的外源基因大小受到限制，会产生多位点整合，导致后代遗传差异以及外 源基因的表达受到影响等不足。
胚胎干细胞介导法将外源基因导人胚胎干细胞中，或用逆转录病毒 作为载体感染胚胎干细胞，然后在体外培养增殖，经过筛选扩增以后，将其植 入正常发育的囊胚腔中，胚胎干细胞会很快地与受体内细胞团聚集在一起，共 同参与正常胚泡的发育，从而发生个体基因的转移。经胚胎干细胞介导法产生 的转基因动物均属嵌合体，在得到的转基因动物之间进行杂交，子代再配对杂 交，就获得了纯合的转基因动物。
精子载体法即将外源基因片段与获能精子一起孵育，然后用携带有 目的基因的精子进行人工授精。此方法的最大优点是不需要昂贵复杂的设备， 而且可以省略不少繁杂的操作。PGCs技术原始生殖细胞（PGCs)介导的转基因技术在原理和方法 上与胚胎干细胞技术相似，应用PGCs技术在制作转基因家禽方面有明显的优势。
转基因技术经过十几年的发展已取得了巨大的进步，目前已得到了转基因 猪、兔、牛、羊及鼠的后代，但该技术也面临很大问题。如整合效率低、成本 高、表达不理想、产品的安全性问题等。随着该技术的广泛应用，如何降低转 基因技术的难度，使之更易于操作，提高转基因技术的成功率，也将是研究人 员需要考虑解决的问题。你都了解了吗？
