甲胎蛋白定量检测试剂盒(化学发光法)
【生产厂家】Roche Diagnostics GmbH
【批准文号】
【剂 型】检测试剂盒
【规 格】
【医保类型】
【国家基本药物】否
英文名：Elecsys AFP
汉语拼音：Jia tai dan bai ding liang jian ce shi ji he hua xue fa guang fa
【注意事项】
【使用目的】
用免疫学方法体外定量测定人血清或血浆中甲胎蛋白(AFP)的含量,有助于非精原细胞瘤病人的治疗管理。
电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys1010/ 和MODULAR ANALYTICS E170（Elecsys模块）免疫测定分析仪。
【概述】
甲胎蛋白类似于白蛋白,分子量为70,000道尔顿,甲胎蛋白来源于卵黄囊、未分化肝细胞和胎儿胃肠道1.2。70－95%的原发性肝癌患者的甲胎蛋白升高8。越是晚期，AFP含量越高。人绒毛膜促性腺激素（HCG）与甲胎蛋白是估计进展期非精原细胞瘤病人生存率的非常重要的两个参数4.9。
但尚未发现甲胎蛋白浓度含量与肿瘤大小、肿瘤的生长、肿瘤分期或恶性程度等有关系。AFP含量显著升高一般提示原发性肝细胞癌。在转移性肝癌中，AFP一般低于350-400IU/ml10。在肝脏再生时，甲胎蛋白也会升高，AFP中度升高也常见于酒精性肝硬化、急性肝炎以及HBsAg携带者10.11。
不推荐将AFP用于普通人群的癌症筛查。
孕妇血清或羊水AFP升高提示胎儿脊柱裂、无脑症、食管闭锁或多胎。AFP降低(结合孕妇年龄)提示未出生的婴儿有Down"s综合征的危险性。3.5.6.7
【试验原理】
采用双抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。
·第1步孵育：10μl标本、生物素化的单克隆AFP特异抗体和钌（Ru）标记的单克隆AFP特异抗体混匀，形成夹心复合物。
·第2步孵育：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
·第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极表面上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。
·检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。
【试剂主要成份】
Elecsys AFP试剂盒，货号：11731327100人份
M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml：链霉亲和素包被的微粒，0.72mg/ml，生物素结合能力：470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。
R1：生物素化的抗AFP抗体（灰盖），1瓶，10ml：生物素化的抗AFP抗体（鼠）：浓度4.5mg/l，磷酸缓冲液100mmol/l，pH6.0，含防腐剂。
R2：Ru(bpy) 32+标记的抗AFP抗体（黑盖），1瓶，10ml：Ru(bpy) 32+标记的抗AFP抗体（鼠）：浓度12.0mg/l，磷酸缓冲液100mmol/l，pH6.0，含防腐剂。
【预防措施和警告】
仅用于体外诊断。
采用使用实验室试剂所必须的标准预防措施。
所有废物的丢弃应遵循当地的要求。
【试剂使用】
试剂盒中的试剂是一个整体,打开后可立即使用,不能被分开。
需要的确切操作信息,分别通过试剂的二维条码读取。
【储存和稳定性】
存放在2－8℃。
为了确保使用前自动混匀期间提供足够量的磁性微粒,甲胎蛋白试剂盒储存,切莫倒置。
稳定性：
未开封2－8℃，可稳定至标明的保质期。
开封后2－8℃， 12周
在E170和Elecsys ，8周
在Elecsys1010上， 4周（交替贮存在冰箱内和仪器上，室温20－25℃，开瓶使用时间累计约20小时）
【标本采集和准备】
标本只有按照下列方法收集,检测,结果才能被接受。
血清标本采集用标准样本试管或含分离胶的试管。
血浆：肝素钠、K3－EDTA或枸橼酸钠抗凝。其中用枸橼酸钠抗凝的血浆，测定结果需+10%校正。
标准:血清值的批内回收90-110%或斜率0.9-1.1+批内干扰<±2×分析灵敏度(LDL)+相关系数>0.95。
标本在2－8℃可稳定7天，-20℃可稳定3个月12。
关于使用含分离胶试管获得的血清的稳定性的资料,要注意试管制造商提供的资料。
当用原始管采集样本时,要注意试管制造商的使用说明.
含沉淀的标本使用前需离心。
不要加热灭活标本。标本和质控品禁用叠氮钠作稳定剂。
确保病人样本、定标物、质控物在测试前温度达到室温20-25℃.
因为可能挥发的影响,放在分析仪上的样本、定标物、质控物应在两小时内测试完。
提供的材料
见“试剂”部分。
需要的材料（未提供）
· Elecsys AFP定标液（CalSet）2×1ml，货号11731602
· Elecsys 肿瘤标志物质控品（PreciControl Tumor Marker）1和2，每个2×3ml,货号11776452
· 常用实验室设备
· Elecsys 1010/或MODULAR ANALYTICS E170
Elecsys1010/分析仪需要
· Elecsys 系统缓冲液（ProCell），6×380ml，货号1662988
· Elecsys 测量池清洗液（CleanCell），6×380ml，货号1662970
· Elecsys 添加剂液（SysWash），1×500ml，货号1930346
· Elecsys 系统清洗液支架（Adapter for SysClean），货号11933159
· Elecsys 1010反应杯（Assay Cup），12×32，货号11706829或Elecsys 反应杯（Assay Cup），60×60， 货号11706802
· Elecsys 吸样头（Assay Tip），30×120，货号11706799
E170分析仪需要
· Elecsys 系统缓冲液（ProCell M）,1×2L,货号12135019
· Elecsys 测量池清洗液（CleanCell M）,1×2L,货号12135027
· Elecsys 系统缓冲液/测量池清洗液预热杯（PC/CC-Cup）,50个,货号03023141
· Elecsys 清洗液（ProbeWash M），12×70ml，用于最终清洗和试剂转换清洗，货号03005712
· Elecsys 反应杯/吸样头盒(AssayCups/AssayTips Combimagazine M),48×84，货号12102137
· Elecsys 废物盒(wasteliner)，货号03023150
· Elecsys 系统清洗液支架(SysClean Adapter M)，货号03027651
各种分析仪均适用的材料
· Elecsys 系统清洗液（SysClean），5×100ml，货号11298500
【方法】
按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。
使用前自动混匀微粒。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。如果特殊情况下仪器无法阅读条形码，可以手工输入15位数字。
Elecsys和E170：
将冷藏试剂预温到20℃后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。仪器自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。
Elecsys1010：
将冷藏试剂预温到20－25℃后放置于仪器的样品/试剂盘上（室温20－25℃），避免产生泡沫。使用前手工打开试剂瓶盖，使用后手工关闭试剂瓶盖并放回2－8℃。
【定标】
描述:此方法以1st IRP WHO 参考标准72/225为标准13。
每批AFP试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用AFP定标液定标校正母定标曲线。
定标频率：
每批试剂盒必须用新鲜试剂定标一次（如：试剂包在仪器上登记后不超过24小时）。另外，以下情况需要再次定标：
E170/Elecsys：
· 同一批号试剂一个月后（28天）
· 7天（放置仪器上的同一试剂盒）
Elecsys1010：
· 每一试剂盒做一次
· 7天（室温20－25℃）
· 3天（室温25－32℃）
各种分析仪均适用的情况：
· 根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。
定标确认:不需要。分析仪的软件会自动检查定标曲线的有效性及任何偏离。
【质控】
Elecsys肿瘤标志物质控品1和2以及其它合适的质控品。
各浓度区域的质控至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如果出现质控值落在范围以外，每个实验室应该有一个方案采取校正措施。
【计算】
对每一个标本，仪器会自动计算AFP含量，单位是IU/ml或ng/ml。
换算方法:IU/ml×1.21=ng/ml
ng/ml×0.83=IU/ml
【干扰因素】
该方法不受黄疸（胆红素<65mg/dl）、溶血（血红蛋白<2.2g/dl）、脂血（脂质<1500mg/dl）和生物素<60ng/ml等干扰(标准:最初值的批内回收:±10%)。
接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血13。
不受类风湿因子干扰（1500U/ml）。
26种常用药物经试验对本测定无干扰。
AFP浓度高达1,000,000IU/ml（1,210,000ng/ml）也不出现钩状效应。
试剂含有鼠单克隆抗体,接受过小鼠单抗治疗或诊断的病人会出现错误报告。
罕见的例子,由于高浓度的抗链霉亲和素抗体发生干扰。
Elecsys AFP含的添加物会有很小的影响。
个别病例高浓度的钌抗体可以引起干扰.
测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。
【检测范围】
0.500-1000IU/ml或0.605-1210ng/ml(由master定标曲线的最低检测限与最高检测限决定)。如果测定值低于最低检测限，报告为＜0.500IU/ml或0.605ng/ml。如果测定值高于检测范围，报告为>1000IU/ml或1210ng/ml(结果达到50,000IU/ml或60500ng/ml样本应作50倍稀释)。
【稀释】
高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。建议1:50稀释(E170,Elecsys1010/既可以自动稀释也可以手工稀释)。稀释后的标本AFP含量必须高于20IU/ml(24ng/ml)。如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释，E170、Elecsys1010/软件会自动计算结果。
【参考值】
下列646名健康受试者样本测定结果用于Elecsys AFP的研究。
结果中有95%≤5.8IU/ml或≤7.0ng/ml
结果中100%≤11.3IU/ml或≤13.6ng/ml
孕妇的AFP参考值(中位数)见下表。“妊娠周数”的计算是从末次月经期的开始日计算。
周数
14
15
16
