前列腺特异抗原定量检测试剂盒(化学发光法)
【生产厂家】
【批准文号】国药准字S0006
【剂 型】检测试剂盒
【规 格】96人份
【医保类型】
【国家基本药物】否
【英文名】The Quantitative Determination Kit for prostate specific antigen(PSA)(Chemiluminescent Immunoassay，CLIA)
【正文】
【用途】
前列腺特异抗原(prostate specific antigen，PSA)是一种由前列腺上皮细胞分泌的糖蛋白，有独特的组织特异性，分子量为33000，含糖量为7%，由240个氨基酸组成，属于糖基化的单链肽。PSA仅存在于前列腺上皮细胞的胞质、导管上皮和粘液内，具有糜蛋白酶样和胰蛋白酶的活性，在前列腺癌诊断中是一种重要的肿瘤标志物，比前列腺酸性磷酸酶(PAP)有更大的特异性和灵敏度。
本试剂盒用于定量测定人血清中前列腺特异抗原(PSA)的含量。PSA在前列腺癌的诊断、病情观察和有无转移灶的判断上是一种重要的观察指标，此项指标已被广泛用于男性体检，以达到对前列腺癌的早期诊断、早期治疗的目的。
【试验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心法。使用2株抗PSA单克隆抗体，用其中一株单抗包被化学发光微孔板，在微孔板各孔中分别加入标准品或血清样品后，再加入另一株辣根过氧化物酶标记的酶标抗体，温育后即形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物。充分洗涤后加入化学发光底物液，测定每孔发光值，其发光强度与PSA浓度成正比。以各标准品浓度的对数和各标准品发光值的对数作线性拟和，得出标准曲线的直线回归方程式，将样品发光值代入方程式就可计算出样品中PSA浓度。
【主要组成成分】
1．PSA包被抗体板 96孔(8孔/条×12条)
2．PSA酶结合物1瓶(10ml)
3．PSA标准品 6瓶(0.5ml/瓶)(S0—S5:0、0.5、2、8、32、64ng/ml)
4．PSA质控血清3瓶(0.5ml/瓶，低值、中值、高值各1瓶)
5．发光底物液A1瓶(6ml)
6．发光底物液B1瓶(6ml)
7．浓缩洗涤液1瓶(15ml，使用时用蒸馏水1:20稀释)
8．不干胶封膜2片
9．说明书 1份
【适用仪器】
适用于测量96孔标准通用规格微孔板的各种类型发光测定仪
【样本要求】
病人标本无须特殊处理，采取正确医用技术取静脉血，分离血清待测。如五天内检测，血清可存放于2-8℃冰箱，否则需将血清样本密封后，置-20℃以下冻存，保存期不超过三个月，避免反复冻融。采血前两周内严禁前列腺按摩及前列腺指检、前列腺穿刺、尿道器械穿刺等检查，以免导致血清PSA升高。
【试验方法】
1．准备:取出试剂盒和血清样品，室温平衡15—30分钟；浓缩洗涤液用蒸馏水1:20稀释待用。
2．往PSA包被抗体板孔中加入20μl标准品、质控或样品，建议标准品加双孔。每孔分别加入酶结合物100μl。
3．微量振荡器振荡10-20秒使其混合均匀，用不干胶封膜覆盖，置37℃温育1小时。
4．甩去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置20秒左右，甩干孔内液体。如此重复4-5次，最后在吸水纸上拍干。
5．每孔加入发光底物液A一滴(50ul)，再加入发光底物液B一滴(50ul)。
6．微量振荡器振荡10-20秒，室温(18—25℃)避光反应15-30分钟，用化学发光仪测定各孔发光值。
7．数据处理:
联机处理:由电脑自动处理得结果。注意选择适合的处理软件，使用log-log线性拟和方式(本试剂盒推荐使用此拟和方式，但也可根据不同情况采用其它拟和方式)进行数据处理。
手工作图:以各标准品浓度为横坐标(X轴)，各标准品发光值为纵坐标(Y轴)在双对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的发光值可从标准曲线上查出PSA浓度。
计算器处理:使用有线性拟和方式的计算器，可以比较方便的计算出标准曲线的直线回归方程式，方程式为:log[发光值]=B×log[浓度]+A。将样品发光值代入方程式计算出样品浓度值。具体操作请查阅计算器使用说明书。
(数据处理时需将标准品、质控或样品的发光值减去S0发光值)
【对试验结果的解释】
1．试验结果质量控制:
0.5ng/mL～64ng/mL浓度范围内用log-log方程拟合，剂量-反应曲线相关系数不低于0.9900；
质控血清测定值应在允许范围内。
如果标准曲线相关系数低于0.9900或者质控血清测定值不在允许范围内，则本次试验视为无效，应重新进行检测。
2．正常参考值:≤3.5ng/ml
由于地区不同，使用的仪器不同，所测正常值存在一定差异，因此本说明书所提供的正常值仅作参考，各实验室应根据病人群体建立自己的正常值范围。另外，正常人PSA的含量随着年龄的增加有所提高，应注意受检者年龄情况。
3．据报道血清PSA定量的阳性临界值为大于10ng/m时，前列腺癌的诊断特异性达90％-97％。最近的实验表明，在前列腺癌中游离PSA/总PSA比正常情况下要低。一般认为F/T(f-PSA/t-PSA)临界值为0.20，在0.20以下均需考虑前列腺癌的问题。PSA在4-10ng/ml时，F/T比值可在良性和恶性前列腺疾病中发生显著的变化，测定f-PSA并结合其他检查能够提高前列腺癌检测的特异性，而不降低其灵敏度。良性前列腺增生、前列腺炎、肾脏和泌尿生殖系统疾病，血清PSA水平也可升高，也应进行其他必要的临床检查加以甄别。约有5％的前列腺癌患者，前列腺酸性磷酸酶(PAP)升高，但PSA在正常水平。此外研究者认为PSA检查值为2.0~4.0ng/ml的人是患前列腺癌的高危人群，应每年检查一次。
【该试验方法的局限性】
1．本试剂盒测定范围为0.5～64ng/mL。超出试剂盒测定范围的测定结果是通过标准品曲线外延得出的计算结果，不作为准确定量数据。
2．严重溶血及高胆固醇样本中PSA浓度测定的可靠性尚未得到充分确认。
【产品性能指标】
1．测定范围:0.5-64ng/ml
2．灵敏度:≤0.25ng/ml
3．标准曲线相关系数:≥0.9900
4．分析内变异系数:CV≤15.00%；分析间变异系数:CV≤20.00%
5．质控血清的测定值:在给定范围内。
【注意事项】
1．本试剂盒及其成分应于2-8℃保存，使用前应平衡至室温，加试剂前必须摇匀。
2．操作前请仔细阅读说明书，不同批号的试剂不得混用。
3．包被板需密封防潮，包被板打开后，剩余包被板应装入袋中密封保存，以免受潮。
4．加样操作应快速准确手法一致，尽量缩短整个加样时间。严格控制每步反应的时间和温度。
5．加样头不可混用，以免交叉污染。使用新加样头操作标准品、质控及酶结合物，以免污染标准品、质控和酶结合物。
6．加标准品或样品时注意将样本加到小孔底部，加酶结合物时加样头不要碰到板孔以免交叉污染。
7．孔内样品需混合均匀，不能有气泡存在。
8．洗涤要彻底，洗涤液应注满每孔，避免产生气泡。每次洗涤应甩干孔内液体，最后应将孔内液体拍干。
9．试剂请在有效期内使用。
10．临床标本均应视为有潜在传染性，请按传染病实验室规程操作。
11．不干胶封膜不可重复使用。
【包装、规格】
96人份/盒
【贮存】
2～8℃保存，防潮。
【有效期】
自检定合格之日起12个月内有效。
【批准文号】
